产品货号:
GS0125
中文名称:
平端DNA加dT试剂盒
英文名称:
T-Tailing Kit
产品规格:
40次|100次
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性,在只有dTTP存在的情况下,在平末端的DNA片段加上一个dT尾巴,主要用于制备T载体。
组分 | 40次 | 100次 |
Taq DNA polymerase(5U/μL) | 50μL | 100μL |
2×dT-tailing Buffer | 0.5mL | 1.5mL |
dTTP Mix | 40μL | 100μL |
保存:-20℃
平末端DNA片段或平末端质粒DNA纯化。
- 在1.5mL无菌干净的离心管中配制下列连接体系:
成分 用量 2×dT-tailing Buffer 25μL DNA片段 0.2~2μg dTTP Mix 1μL Taq DNA polymerase 1μL Sterilized ddH2O 至50μL - 一般最后加入Taq DNA polymerase。
- 在离心机上微离3~5 s,72℃保温2h。
- 酚/氯仿抽提去除反应体系中的Taq DNA polymerase。
- 加T反应后,Taq DNA polymerase将与DNA末端紧密结合,所以必须酚/氯仿抽提去除。
- 如果使用Proteinase K处理后再用酚/氯仿抽提效果会更好。
- 加T反应后,Taq DNA polymerase将与DNA末端紧密结合,所以必须酚/氯仿抽提去除。
- 得到的DNA溶于适量水和TE中后即可用于后续连接反应。
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